论文部分内容阅读
摘要 网箱养殖黄颡鱼常因管理不当造成体表溃疡。该文就溃疡部位进行病原的检验检疫，确定为维纳斯气单胞菌。针对病原引起的病害，提出有针对性的防治措施。
关键词 黄颡鱼；体表溃疡病；病原；检验检疫；病害防治
中图分类号 S943 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2014）14-0233-01
黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）俗称黄鼓鱼，属鲇形目（Siluriformes）鲿科（Bagridae）黄颡鱼属（Pelteobagrus），是我国优质名贵的淡水鱼类，其肉质细嫩，味道鲜美，无小刺，蛋白含量高，颇受广大消费者喜爱。近年来，随着规模不断扩大，池塘养殖鱼体的品质得不到保证，与野生品种差异很大。网箱养殖黄颡鱼是生产优质黄颡鱼的方法之一，但在网箱养殖中黄颡鱼体表溃疡病的发生严重影响了经济效益。该文对患溃疡病黄颡鱼病原菌进行检验检疫，进而确定病原菌针对性的病害防治技术，旨在为养殖生产中有效防治该病提供科学依据[1]。
1 材料与方法
1.1 材料来源
病鱼来源于邳州市港上镇某黄颡鱼网箱养殖厂，体长8～10 cm；普通营养琼脂培养基、氧化酶试剂用购自青岛高科园海博生物技术有限公司的普通营养琼脂粉配制而成，营养肉汤用购自杭州天和微生物试剂有限公司的营养肉汤粉配制而成，所有培养基经无菌检验合格后4 ℃保存备用。BD细菌鉴定系统和微生物麦氏浊度仪、肠杆菌/非发酵菌鉴定试剂盒，碧迪医疗器械（上海）有限公司。
1.2 病鱼的解剖以及病原菌的分离
通过对病鱼进行检验未发现有寄生虫，体表有黑色溃疡处，口和下颌处溃疡严重。在无菌条件下剥离溃疡处表面组织，取病灶处一小块组织于装有营养肉汤的血清瓶中，含有溃疡组织的血清瓶置于SHP-160生化培养箱培养24 h[2]。
1.3 病原菌的纯化培养
24 h后发现血清瓶菌液浑浊，在无菌操作台将血清瓶中的菌液接种于营养琼脂平板上，在SHP-160生化培养箱培养24 h，培养的过程中为了保持培养箱的湿度，在培养箱中部放一杯蒸馏水。待菌落长出后，选取形态单一的单菌落进一步纯化，直到获得纯培养物菌种[3]。获得的纯培养物菌种转接至营养琼脂斜面保存。
1.4 病原菌的检验检疫
将滤纸用氧化酶试剂湿润，用接种针挑取单个菌落，涂布在试纸上，发现30 s内颜色变为蓝色，该病原菌氧化酶试验为阳性。将纯化后的菌接种到AHM鉴别培养基，待菌落长出后在鉴别培养基的顶部，滴加3～4滴Kvacs试剂，发现沿试管内壁出现红色环，该病原菌产生吲哚，判为阳性。对该细菌进行革兰氏染色，染色后镜检，该病原菌为革兰氏阴性短杆菌。
2 结果与分析
2.1 鉴定板条的制备
将所需鉴定的病原菌接种到BBL CRYSTAL肠杆菌/非发酵菌鉴定接种液中，并混匀。盖上管盖，旋窝震荡10～15 s，用微生物浊度仪测量菌悬液的浓度在0.48麦氏浊度。取一个基托，并在侧壁上标记编号，将所有鉴定接种液倾注入基托的目标区域，双手握住基托并沿着轨道平缓的翻滚，直至培养液注满所有孔。通过翻转把过多的液体引到目标区域并且把基托放置到工作台上；调整盖板使得盖板盖有标签的一端在基托目标区域的上方，向下按压感觉有轻微的抵抗力，把拇指放到盖板的边缘向着各检测板的中央并同时下推直到板盖在发出“噼啪”声就位（2个滴答声为准）。
2.2 鉴定板条的培养
将已经处理好的板条放入SHP-160生化培养箱中，在36 ℃条件下培养6 h。为保持培养箱温度适宜，在培养箱中部放置一杯蒸馏水。
2.3 病原菌的判读[4]
将培养好的板条从培养箱中取出。将板条标签纸一面朝下朝外放入BBL CRYSTAL全自动细菌鉴定仪读取检测版，经检测鉴定以及复查测得该病原菌为维纳斯气单胞菌。
3 结论与讨论
药敏试验表明，庆大霉素、氟哌酸、诺氟沙星的抑菌圈最大，疗效最好。建议养殖户用恩诺沙星进行治疗，通过3 d连续性的治疗，网箱中的黄颡鱼死亡数量逐渐减少，最终治愈。
黄颡鱼体表溃疡病在6月上旬阴雨天气发生，在喂食的过程中投喂量过大以及降雨过程中不明水源对养殖水体的污染也是鱼体患病的原因。在平时的喂食过程中要注意8分饱，在阴雨天气一定要控制喂食的食量。温和气单胞菌广泛存在于水、土壤中，属条件性致病菌，其主要的致病因子是产生各种溶血素和肠毒素，具有发病率高、感染快、传播快、死亡快的特点。黄颡鱼本身无鳞片，在养殖过程中极易被细菌、病毒、寄生虫危害，在养殖过程中要注重水体的调节，控制放养密度，力争做到病害的“预防为主、防治结合”、“防重于治”。
4 参考文献
[1] 王文彬，罗玉双，曾伯平.黄颡鱼的微生物病及其防治[J].内陆水产，2006（11）：35-37.
[2] 郑福涛，陈绍铭.水生微生物学实验法[M].北京：海洋出版社，1990.
[3] 张伟妮，朱志华，陈智伟，等.2010.日本鳗鲡腐皮病病原菌的分离及鉴定[J].淡水渔业，40（2）：41-46.
[4] 东秀株，蔡妙英.常见细菌鉴定手册[M].北京：科学出版社，2001.
关键词 黄颡鱼；体表溃疡病；病原；检验检疫；病害防治
中图分类号 S943 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2014）14-0233-01
黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）俗称黄鼓鱼，属鲇形目（Siluriformes）鲿科（Bagridae）黄颡鱼属（Pelteobagrus），是我国优质名贵的淡水鱼类，其肉质细嫩，味道鲜美，无小刺，蛋白含量高，颇受广大消费者喜爱。近年来，随着规模不断扩大，池塘养殖鱼体的品质得不到保证，与野生品种差异很大。网箱养殖黄颡鱼是生产优质黄颡鱼的方法之一，但在网箱养殖中黄颡鱼体表溃疡病的发生严重影响了经济效益。该文对患溃疡病黄颡鱼病原菌进行检验检疫，进而确定病原菌针对性的病害防治技术，旨在为养殖生产中有效防治该病提供科学依据[1]。
1 材料与方法
1.1 材料来源
病鱼来源于邳州市港上镇某黄颡鱼网箱养殖厂，体长8～10 cm；普通营养琼脂培养基、氧化酶试剂用购自青岛高科园海博生物技术有限公司的普通营养琼脂粉配制而成，营养肉汤用购自杭州天和微生物试剂有限公司的营养肉汤粉配制而成，所有培养基经无菌检验合格后4 ℃保存备用。BD细菌鉴定系统和微生物麦氏浊度仪、肠杆菌/非发酵菌鉴定试剂盒，碧迪医疗器械（上海）有限公司。
1.2 病鱼的解剖以及病原菌的分离
通过对病鱼进行检验未发现有寄生虫，体表有黑色溃疡处，口和下颌处溃疡严重。在无菌条件下剥离溃疡处表面组织，取病灶处一小块组织于装有营养肉汤的血清瓶中，含有溃疡组织的血清瓶置于SHP-160生化培养箱培养24 h[2]。
1.3 病原菌的纯化培养
24 h后发现血清瓶菌液浑浊，在无菌操作台将血清瓶中的菌液接种于营养琼脂平板上，在SHP-160生化培养箱培养24 h，培养的过程中为了保持培养箱的湿度，在培养箱中部放一杯蒸馏水。待菌落长出后，选取形态单一的单菌落进一步纯化，直到获得纯培养物菌种[3]。获得的纯培养物菌种转接至营养琼脂斜面保存。
1.4 病原菌的检验检疫
将滤纸用氧化酶试剂湿润，用接种针挑取单个菌落，涂布在试纸上，发现30 s内颜色变为蓝色，该病原菌氧化酶试验为阳性。将纯化后的菌接种到AHM鉴别培养基，待菌落长出后在鉴别培养基的顶部，滴加3～4滴Kvacs试剂，发现沿试管内壁出现红色环，该病原菌产生吲哚，判为阳性。对该细菌进行革兰氏染色，染色后镜检，该病原菌为革兰氏阴性短杆菌。
2 结果与分析
2.1 鉴定板条的制备
将所需鉴定的病原菌接种到BBL CRYSTAL肠杆菌/非发酵菌鉴定接种液中，并混匀。盖上管盖，旋窝震荡10～15 s，用微生物浊度仪测量菌悬液的浓度在0.48麦氏浊度。取一个基托，并在侧壁上标记编号，将所有鉴定接种液倾注入基托的目标区域，双手握住基托并沿着轨道平缓的翻滚，直至培养液注满所有孔。通过翻转把过多的液体引到目标区域并且把基托放置到工作台上；调整盖板使得盖板盖有标签的一端在基托目标区域的上方，向下按压感觉有轻微的抵抗力，把拇指放到盖板的边缘向着各检测板的中央并同时下推直到板盖在发出“噼啪”声就位（2个滴答声为准）。
2.2 鉴定板条的培养
将已经处理好的板条放入SHP-160生化培养箱中，在36 ℃条件下培养6 h。为保持培养箱温度适宜，在培养箱中部放置一杯蒸馏水。
2.3 病原菌的判读[4]
将培养好的板条从培养箱中取出。将板条标签纸一面朝下朝外放入BBL CRYSTAL全自动细菌鉴定仪读取检测版，经检测鉴定以及复查测得该病原菌为维纳斯气单胞菌。
3 结论与讨论
药敏试验表明，庆大霉素、氟哌酸、诺氟沙星的抑菌圈最大，疗效最好。建议养殖户用恩诺沙星进行治疗，通过3 d连续性的治疗，网箱中的黄颡鱼死亡数量逐渐减少，最终治愈。
黄颡鱼体表溃疡病在6月上旬阴雨天气发生，在喂食的过程中投喂量过大以及降雨过程中不明水源对养殖水体的污染也是鱼体患病的原因。在平时的喂食过程中要注意8分饱，在阴雨天气一定要控制喂食的食量。温和气单胞菌广泛存在于水、土壤中，属条件性致病菌，其主要的致病因子是产生各种溶血素和肠毒素，具有发病率高、感染快、传播快、死亡快的特点。黄颡鱼本身无鳞片，在养殖过程中极易被细菌、病毒、寄生虫危害，在养殖过程中要注重水体的调节，控制放养密度，力争做到病害的“预防为主、防治结合”、“防重于治”。
4 参考文献
[1] 王文彬，罗玉双，曾伯平.黄颡鱼的微生物病及其防治[J].内陆水产，2006（11）：35-37.
[2] 郑福涛，陈绍铭.水生微生物学实验法[M].北京：海洋出版社，1990.
[3] 张伟妮，朱志华，陈智伟，等.2010.日本鳗鲡腐皮病病原菌的分离及鉴定[J].淡水渔业，40（2）：41-46.
[4] 东秀株，蔡妙英.常见细菌鉴定手册[M].北京：科学出版社，2001.