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利用ＰＣＲ技术，将胰岛素原基因中Ａ６和Ａ１１的Ｃｙｓ序列突变成Ａｌａ序列，以去除Ａ链的链内二硫键。突变基因连接到质粒ｐＢＶ２２０，构建了表达质粒ｐＪＧ４０３，并且在大肠肝菌中得到表达，经过Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－５０层析可得到纯化的突变人胰岛素原（Ｍｕｔ－ＨＰＩ－Ａｌａ）。纯化产物用胰蛋白酶和羧肽酶处理，并经Ｒｅｓｏｕｒｃｅ Ｑ阴离子交换柱层析可进一步获得纯化的突变人胰岛素（Ｍｕｔ－ＨＩ－Ａｌａ）。