【摘 要】
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目的 观察BTBD10基因在大鼠胰岛β细胞株INS-1细胞过表达后对其增生的影响和可能机制.方法 构建重组真核表达质粒pcDNA4.0-BTBD10,利用脂质体转染INS-1细胞,转染后48 h筛选获
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目的 观察BTBD10基因在大鼠胰岛β细胞株INS-1细胞过表达后对其增生的影响和可能机制.方法 构建重组真核表达质粒pcDNA4.0-BTBD10,利用脂质体转染INS-1细胞,转染后48 h筛选获得稳定表达细胞株,Western blot方法验证BTBD10表达.四唑盐比色法(MTT法)测定INS-1细胞增殖活性.Western blot方法检测蛋白激酶B(PKB,又名Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、哺乳动物的雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和磷酸化-mTOR (p-mTOR)的蛋白表达.结果 成功构建BTBD10过表达的稳定INS-1细胞株,BTBD10的高表达可增加INS-1细胞的增殖活性,促进INS-1细胞p-Akt和p-mTOR的表达,而Akt和mTOR蛋白表达无明显变化.结论 BTBD10在INS-1细胞的过表达可通过促进Akt和mTOR的磷酸化水平而激活Akt/mTOR信号通路,使细胞总体蛋白质翻译水平升高,从而促进INS-1细胞的增殖.
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