【摘 要】
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目的观察miR-183在体外通过靶向调控程序性细胞死亡因子4(PDCD4)对SW1990胰腺癌细胞生长的调节作用。方法将不同浓度的miR-183模拟物(miR-183mimics)和拮抗剂(miR-183inhibit
【机 构】
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南京医科大学附属上海一院临床医学院消化内科,
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目的观察miR-183在体外通过靶向调控程序性细胞死亡因子4(PDCD4)对SW1990胰腺癌细胞生长的调节作用。方法将不同浓度的miR-183模拟物(miR-183mimics)和拮抗剂(miR-183inhibitors)通过细胞转染技术转入SW1990胰腺癌细胞株中,筛选出合适浓度,进一步应用实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot检测PDCD4基因和蛋白表达水平;MTT法检测miR-183inhibitors对SW1990细胞生长的影响,流式细胞术和Hoechst染色检测SW1990细胞凋亡和细胞周期,Western blot检测抗凋亡基因bcl-2蛋白的表达。结果细胞转染50nmol/L miR-183mimic和150nmol/L inhibitor后,miR-183基因的表达量与对照比较差异有统计学意义(P<0.05)。qPCR和Western blot发现miR-183 mimics能下调PDCD4的表达,而miR-183inhibitors能上调PDCD4的表达,下调bcl-2(P<0.05)。MTT法显示miR-183inhibitors能抑制细胞增殖,流式细胞术和Hoechst染色显示miR-183inhibitors能促进胰腺癌细胞的凋亡及阻滞细胞周期于G0/G1期。结论 miR-183拮抗剂体外能抑制胰腺癌细胞增殖,促进凋亡和阻滞细胞周期,且可能通过靶向调节PDCD4基因发挥其调节作用。
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