【摘 要】
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目的 建立检测鼠类携带淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(lymphocytic choriomeningitis virus,LCMV)的实时荧光定量RT-PCR方法. 方法 根据LCMV核蛋白编码基因序列设计合成特异性引
【机 构】
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大榭出入境检验检疫局,浙江宁波315812
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目的 建立检测鼠类携带淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(lymphocytic choriomeningitis virus,LCMV)的实时荧光定量RT-PCR方法. 方法 根据LCMV核蛋白编码基因序列设计合成特异性引物对和TaqMan荧光探针,经优化反应体系和条件,建立LCMV实时荧光定量RT PCR检测方法,然后进行灵敏度、特异性和重复性试验,并对79份宁波口岸捕获的鼠样品进行检测. 结果 建立实时荧光定量RT-PCR方法对鼠肺总RNA检测的灵敏度为20 pg,是常规PCR方法的100倍;试验的重复性良好,CV值为0.85％;试验的特异性为100％.用该方法检测79份鼠样品有3份LCMV阳性,与常规RT-PCR结果一致. 结论 成功建立了鼠LCMV实时荧光定量RT-PCR检测方法,对于监测和防控鼠传LCM有重要意义.
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