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背景:人脐带间充质干细胞作为新的种子细胞来源,如何迅速提高其增殖以满足临床所需的数量和质量,是迫切需要解决的现实问题。目的:探讨不同的灌注启动时间、灌注频率和灌注体积对人脐带间充质干细胞扩增和代谢的影响,建立高密度培养的半连续灌注培养工艺。方法:培养传代人脐带间充质干细胞,以批培养方式为参照,半连续灌注培养分成3组。①灌注启动时间组:批培养24h和48h,分别开始换液,每2d更换75%。②灌注频率组:批培养48h开始换液,频率分别为每1,2,3d,换液体积比为75%。⑧灌注体积组:批培养48h开始换液,频