【摘 要】
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背景目前，视网膜Muller细胞的干细胞特性日益受到关注，优化Muller细胞的培养方法对视网膜干细胞治疗的进一步研究具有重要意义。目的对视网膜Muller细胞的原代培养方法加以改良，建立一种简单、有效的实验室分离纯化Muller细胞的方法。方法取新生SPF级SD大鼠眼球，培养基浸泡后室温条件下避光过夜，显微镜下分离视网膜，直接吹打成微小组织悬液后接种于培养瓶中，8～10d后行第1次换液，之后2～
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院眼科,北京100730,中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院眼科,北京100730
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背景目前，视网膜Muller细胞的干细胞特性日益受到关注，优化Muller细胞的培养方法对视网膜干细胞治疗的进一步研究具有重要意义。目的对视网膜Muller细胞的原代培养方法加以改良，建立一种简单、有效的实验室分离纯化Muller细胞的方法。方法取新生SPF级SD大鼠眼球，培养基浸泡后室温条件下避光过夜，显微镜下分离视网膜，直接吹打成微小组织悬液后接种于培养瓶中，8～10d后行第1次换液，之后2～3d换液1次，至细胞完全融合后进行传代。细胞形态一致后于光学显微镜下观察细胞的形态特征，免疫荧光法检测Muller细胞标志物谷氨酰胺合成酶（GS）和波形蛋白（Vimentin）的表达，进行细胞鉴定；采用流式细胞术对所得细胞进行纯度检测。结果原代培养的Muller细胞胞体狭长，细胞质丰富。传至3代的细胞95％以上对GS和Vimentin反应阳性，阳性染色主要位于细胞质和细胞核。Vimentin阳性染色主要位于细胞质。流式细胞仪检测显示传3代后99．7％的细胞GS表达阳性。结论采用Muller细胞改良法一流式细胞术对所得细胞进行纯度检测，简单可行，收获的细胞数量多、纯度高。
其他文献
背景 研究表明,Kruppel样因子6（KLF6）与生长发育、细胞分化、增生、凋亡、血管生成及组织修复等生理或病理过程有关.在眼科领域,关于人晶状体上皮细胞（LECs）中KLF6蛋白表达水平及KLF6对LECs增生的影响报道较少. 目的 探讨KLF6对LECs株（HLE-B3）增生的抑制作用. 方法 首先用逆转录PCR（RT-PCR）法构建真核表达质粒pEGFP-C2-KLF6,并用双酶切法和PC
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2014年6月27—29日河南省第二十次眼科学术年会在郑州召开，本次学术年会得到了河南省医学会、河南省医师协会的大力支持和帮助，各地市眼科学会进行了精心的组织和准备。会议共收到学术论文265篇，内容涉及眼科基础研究、眼科形态学和功能检查以及青光眼、白内障、眼底病、眼表疾病、眼眶病、眼整形、眼外伤、泪，道病等亚专业。会议注册代表423人，参展厂商60家。
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1名词术语医学名词应使用全国科学技术名词审定委员会公布的名词。尚未通过审定的学科名词，可选用最新版《医学主题词表（MeSH）》、《医学主题词注释字顺表》、《中医药主题词表》中的主题词。对没有通用译名的名词术语文内首次出现时应注明原词。
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背景视网膜色素上皮（RPE）细胞和Mtiller细胞在维持视网膜的正常代谢中起重要作用，多种生理、病理过程与二者的相互作用有关。目的利用Transwell小室体外共培养兔Mtiller细胞与RPE细胞，观察缺氧条件下Moller细胞对RPE细胞增生和迁移的影响。方法应用组织块培养法和酶消化法分别培养原代兔Mtiller细胞和RPE细胞，免疫组织化学法鉴定2种细胞。取第3代培养良好的细胞进行试验。应
根据国际医学期刊编辑委员会提供的“生物医学期刊投稿统一要求”的表述，本刊对作者撰写稿件时关于”知情同意“和“医学伦理学”描述提出如下要求：（1）对以人体为试验对象的研究，作者应该提及试验步骤是否符合相应的负责机构或1975年赫尔辛基宣言（2005年修订）的医学伦理学标准。如果研究过程对是否符合赫尔辛基宣言有疑问或存在一定的问题，作者应当做出客观说明并解释研究的合理性，提交已通过审查机构的批准情况。
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P13K／Akt：磷脂酰肌醇-3-羟基酶／苏氨酸激酶phosphatidylinositol 3-kinase／proteinkinaseBRPE：视网膜色素上皮 retinal pigment epitheliumJNK：c—jun N末端激酶 c—jun N terminal kinase。