【摘 要】
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以Ⅵ型人胶原蛋白A2链基因为模板，PCR扩增得到目的基因CP6，构建了重组胶原蛋白表达载体，然后筛选高效表达的宿主菌，检测重组质粒的不稳定性以及对重组菌培养条件进行优化。结果表
【机 构】
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吉林工商学院粮油食品深加工吉林省重点实验室,东北师范大学生命科学学院,吉林农业大学生命科学学院
【基金项目】
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2014年吉林省教育厅项目;吉林省科技厅青年基金项目(20140520145JH);吉林省2012年博士后科研项目启动项目
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以Ⅵ型人胶原蛋白A2链基因为模板，PCR扩增得到目的基因CP6，构建了重组胶原蛋白表达载体，然后筛选高效表达的宿主菌，检测重组质粒的不稳定性以及对重组菌培养条件进行优化。结果表明，重组胶原蛋白在Rosetta（DE3）中表达量相对最高，重组质粒稳定性也较高。较佳的表达条件为接种量4%或5%，37℃、200 r/min培养至OD600 nm为0.7时，加入0.5 mol/L IPTG，培养5 h，并且纯化的重组蛋白与小鼠抗人COL6A2的单克隆抗体有特异性反应。
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