探讨不同分化程度的食管鳞癌细胞对雷帕霉素的敏感性差异以及以p70S6K–siRNA干扰p70S6K表达后食管鳞癌EC9706细胞对雷帕霉素敏感性的变化。
方法以细胞计数盒8(CCK–8)法检测雷帕霉素对不同分化程度食管鳞癌细胞(EC9706、TE–1、Eca109、KYSE790、KYSE450)增殖的影响,并根据检测结果,选取对雷帕霉素不敏感的EC9706细胞株转染p70S6K–siRNA。采用CCK–8法、流式细胞术和裸鼠成瘤实验,检测转染前后EC9706细胞对雷帕霉素敏感性的变化。
结果CCK–8法检测结果显示,5株食管鳞癌细胞对低浓度雷帕霉素(≤100 nmol/L)均敏感,而低分化细胞株TE–1和EC9706对高浓度雷帕霉素却易产生耐药性。经50、100、200、500和1 000 nmol/L雷帕霉素+p70S6K–siRNA处理后,EC9706细胞的增殖率分别为(48.67±1.68)%、(15.45±1.54)%、(14.00±0.91)%、(10.97±0.72)%和(2.70±0.32)%,均分别明显低于50、100、200、500和1 000 nmol/L雷帕霉素+对照siRNA处理组[(74.53±1.71)%、(68.27±1.35)%、(71.74±2.44)%、(76.23±1.02)%和(80.21±2.77)%,均P<0.05]。流式细胞仪检测结果显示,p70S6K–siRNA组、雷帕霉素组和p70S6K–siRNA+雷帕霉素组EC9706细胞中G1期细胞的比例分别为(53.82±1.78)%、(57.87±4.01)%和(73.73±3.68)%,均明显高于对照组[(46.09±2.31)%,均P<0.05]。裸鼠体内实验的结果显示,转染p70S6K–siRNA后,雷帕霉素对裸鼠体内移植瘤生长的抑制作用也增强,抑瘤率高达96.5%。
结论不同分化程度的食管鳞癌细胞对雷帕霉素的敏感性不同,p70S6K–siRNA在体内外均能提高食管鳞癌EC9706细胞对雷帕霉素的敏感性。