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目的获取野生型产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)基因、构建LTS63K突变体并进行序列分析.方法用改进的细菌基因组提取含野生型LT基因质粒,用PCR技术扩增LT的DNA,并亚克隆至pMD18-T中进行点突变和序列分析.结果从野生型大肠杆菌提取大质粒的新法可行,所克隆的LT基因与GenBank公布的完全一致,点突变正确.结论所克隆的基因和突变基因可用于重组表达和免疫佐剂的相关研究.