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LT质粒的新法提取及无毒突变体LTS63K的构建和序列分析

来源 :免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：shmi1

【摘 要】

：

目的获取野生型产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)基因、构建LTS63K突变体并进行序列分析.方法用改进的细菌基因组提取含野生型LT基因质粒,用PCR技术扩增LT的DNA,并亚克隆至pMD

【作 者】

：

冯强 邹全明 蔡绍皙 毛旭虎 冉向阳 

【机 构】

：

第三军医大学临床微生物学教研室,重庆大学生物工程学院

【出 处】

：

免疫学杂志

【发表日期】

：

2002年5期

【关键词】

：

LT质粒 提取 无毒突变体 LTS63K 构建 序列分析 LT  LTS63K   sitedirected mutagenesis  sequence ana 

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目的获取野生型产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)基因、构建LTS63K突变体并进行序列分析.方法用改进的细菌基因组提取含野生型LT基因质粒,用PCR技术扩增LT的DNA,并亚克隆至pMD18-T中进行点突变和序列分析.结果从野生型大肠杆菌提取大质粒的新法可行,所克隆的LT基因与GenBank公布的完全一致,点突变正确.结论所克隆的基因和突变基因可用于重组表达和免疫佐剂的相关研究.

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