核干细胞因子增强间充质干细胞心肌保护作用

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目的 研究核干细胞因子( nucleostemin,NS)过表达对脂肪来源间充质干细胞( ADSC)移植后的生存和心肌保护作用的影响。方法 分离培养小鼠 ADSC,分别转染 NS腺病毒( ADSC-NS)和对照腺病毒( ADSC-Con), CM-DiI标记 ADSC。制作小鼠心肌梗死( MI)模型,随机分为以下 4组:① Sham组(与 MI相同操作但不结扎冠脉),② MI+vehicle组(冠脉结扎后,在左心室前壁、侧壁和后壁立即心肌点注射总量 20 μl PBS),③ MI+ADSC-Con组(心肌点注射 20 μl含 2×105新鲜 ADSC-Con的悬液),④ MI+ADSC-NS组(心肌点注射 20 μl含 2×105的新鲜 ADSC-NS的悬液)。 MI 3 d后,免疫荧光和流式检测 ADSC存活率, TUNEL法检测心肌细胞凋亡。 MI 4周后,超声心动图检测心脏结构和功能, MASSON-三色染色测定心肌梗死面积,实时定量 PCR检测心房钠尿肽( ANP)和脑钠尿肽( BNP)表达水平。在细胞水平将 ADSC分为以下各组:①对照腺病毒( ADSC-Con)组,② NS腺病毒(ADSC-NS)组,③对照腺病毒 +对照( ADSC-Con+Control)组,④ NS腺病毒 +对照( ADSC-NS+Control)组,⑤对照腺病毒 +双氧水( ADSC-Con+H2O2)组,⑥ NS腺病毒 +双氧水( ADSC-NS+H2O2)组。检测 NS过表达对 ADSC增殖、迁移和抗凋亡作用的影响。结果  MI 3 d后,与 ADSC-Con相比, ADSC-NS显著增加 (P<0.05)ADSC移植后在心肌组织中的存活率,显著降低心肌细胞凋亡率 (P<0.05)。MI 4周后, ADSC-NS移植显著增加左心室射血分数,降低左心室内径,降低心肌梗死面积和 ANP、BNP的 mRNA表达。在细胞水平, NS过表达促进 ADSC增殖和抗凋亡作用,对 ADSC的迁移无显著影响。结论  NS过表达通过增加 ADSC的增殖和抗凋亡能力,增强 ADSC移植对心脏的保护作用。
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