nm23-M2 cDNA克隆、表达及抗体制备

来源 :中国医学文摘:计划生育妇产科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yh820927
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为通过基因工程技术表达和纯化重组nm23-M2蛋白,进而制备高效价、高特异性的抗血清。构建在大肠杆菌中高效表达pQE30/nm23-M2表达质粒,Ni^+-NTA亲和层析纯化;用纯化蛋白免疫兔,制备抗血清并纯化,琼脂双向扩散法测效价,免疫组织化学比较它与抗NM23-H2抗体的特异性。结果:nm23-M2 cDNA序列完全正确,表达的17KD可溶性融合蛋白占菌体总蛋白45%,纯化后纯度97%以上,抗血清效价为1:64—128,提纯后纯度在90%以上,特异性高于NM23-H2抗体。
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