【摘 要】
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高质量RNA的提取是开展云南栘[木衣]分子生物学研究的前提.采用OMEGA (Plant RNA Kit 50)试剂盒、TIANGEN(TRNzol-A+Reagent)试剂盒、CTAB法、Trizol法、SDS法及其改良法6种
【机 构】
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西南林业大学,云南省高校林木遗传改良与繁育重点实验室,云南昆明650224西南林业大学,西南山地森林保育与利用省部共建教育部重点实验室,云南昆明650224;
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高质量RNA的提取是开展云南栘[木衣]分子生物学研究的前提.采用OMEGA (Plant RNA Kit 50)试剂盒、TIANGEN(TRNzol-A+Reagent)试剂盒、CTAB法、Trizol法、SDS法及其改良法6种方法提取云南移[木衣]叶片的RNA,并用琼脂糖凝胶电泳、核酸蛋白检测仪及RT PCR技术比较了6种不同方法提取的总RNA样品的质量.结果 表明,2种试剂盒法和trizol 法不适合云南移[木衣] RNA提取,无法得到28S、18SrRNA条带,CTAB法和SDS法虽能得到RNA的3条带,但拖带现象严重,A260/A230的比值较低,对SDS法进行改进,提高β-巯基乙醇的量,在缓冲液中增加PVP,使用HiBind RNA Mini柱,有效地抑制多酚多糖的污染,得到了较高质量、可用于RT PCR扩增的云南移[木衣]的RNA.对其开展分子生物学研究提供技术支撑.
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