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目的对绿脓杆菌外毒素A(pseudomonas aeruginosa exotoxin A,PEA)的常用肽编码基因进行克隆,为后续的基因改良奠定物质基础。方法以绿脓杆菌基因组DNA为模板,以PEA编码基因特异区段为引物,克隆绿脓杆菌外毒素A常用肽编码基因,经菌落PCR筛选出阳性克隆后再进行DNA测序分析。结果PCR产物克隆后,菌落PCR挑选得到了3个有意义的阳性克隆,DNA测序结果与GenBank中登录的序列之间一致性达99%。结论成功获得3个阳性克隆;选择适当的退火温度,采用Touchdown PCR