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反向遗传技术（reverse genetics，RG）是一种通过cDNA克隆来拯救RNA病毒基因组片段，进而复制出设计表型的病毒的现代生物基因工程手段，目前被广泛应用于流感病毒重配株的构建。回顾流感病毒反向遗传技术发展的历史，并介绍目前该技术在禽流感疫苗研发方面的实际应用，为禽流感的防治、流感病毒以及其他RNA病毒的研究提供新的思路。