人SIRT6蛋白的原核表达及纯化

来源 :生物技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liu0686

【摘要】

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目的:构建带GST标签的人源沉默信息调节因子6(SIRT6)基因原核表达载体并表达纯化GST-SIRT6重组蛋白。方法:以人乳腺文库为模板,经PCR扩增,酶切后插入带GST标签的pGEX-KG载体,

【作者】

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罗沙柳任鑫鑫罗菲梁迎春马超刘坤冉芳施亚娇李玲

【机构】

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贵州大学医学院,军事科学院军事医学研究院生物工程研究所,山西医科大学第二医院,大连医科大学肿瘤干细胞研究院,中部战区总医院卫勤部科训科

【出处】

：

生物技术通讯

【发表日期】

：

2019年6期

【关键词】

：

人SIRT6基因克隆原核表达 human sirtuin 6(SIRT6)genecloningprokaryotic expression

【基金项目】

：

国家自然科学基金(81902838,81372596,81802756)

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目的:构建带GST标签的人源沉默信息调节因子6(SIRT6)基因原核表达载体并表达纯化GST-SIRT6重组蛋白。方法:以人乳腺文库为模板,经PCR扩增,酶切后插入带GST标签的pGEX-KG载体,连接成GST-SIRT6重组质粒进行测序;GST-SIRT6重组质粒转化大肠杆菌BL21感受态,并加入IPTG进行小量诱导,通过Western印迹检测GST-SIRT6蛋白表达;将能成功诱导GST-SIRT6表达的菌液大量扩增,IPTG诱导后利用GST-Sepharose 4B亲和珠纯化GST-SIRT6蛋白,

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