【摘 要】
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建立酪蛋白酶解产生抗菌肽的最适条件,对酶解产物进行分离。建立抗菌肽活性测定方法,并对酪蛋白源抗菌肽的理化特性予以评价。本实验采用胰蛋白酶在不同时间条件下水解酪蛋白
【机 构】
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南京大学医学院附属鼓楼医院动物实验中心,南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室
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建立酪蛋白酶解产生抗菌肽的最适条件,对酶解产物进行分离。建立抗菌肽活性测定方法,并对酪蛋白源抗菌肽的理化特性予以评价。本实验采用胰蛋白酶在不同时间条件下水解酪蛋白,经凝胶过滤和RP-HPLC分离纯化制备抗菌肽,酶解液及其分离物质对不同菌株的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌活性进行了测定。结果表明:2,3 h胰蛋白酶的酪蛋白水解液均具有抗菌活性,且有良好的热稳定性。酪蛋白和胰蛋白酶本身无抗菌活性。2h水解液对大肠杆菌ATCC25922和金黄色葡萄球菌CMCC26801的最小抑菌浓度(MinimalInhibitory Concentration,MIC)分别是1.20 mg/ml和0.34 mg/ml。2h水解液经SephadexG-15分离收集的5#组分有抗菌活性,RP-HPLC检测有较单一肽吸收峰。说明酪蛋白经酶水解可以产生抗菌活性肽。
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