应用m2-Gi1α融合蛋白鉴别M2受体的特异性药物

来源 :中国药学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aptxkid2009
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目的表达m2-Gilα融合蛋白,通过检测GDP与m2-Gilα融合蛋白的亲和力大小来鉴别m2受体的特异性激动剂、拮抗剂和反向激动剂.方法用两步PCR反应重组m2-Gilα融合蛋白cDNAs,并插入到pBacPAK9病毒载体中,利用Sf9细胞表达M2受体蛋白和m2-Gilα融合蛋白,通过[3H]QNB结合饱和实验及[35S]GTPγS竞争性替代结合实验,检测受体表达水平及GDP与m2-Gilα融合蛋白的亲和力.结果m2-Gilα融合蛋白表达水平是(18.14±0.17)pmol·mg(膜
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