【摘 要】
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目的建立原核生物[大肠杆菌(E.coli)]和真核生物(酵母菌和CHO细胞)宿主DNA残留的检测方法,并比较检测方法的灵敏度。方法以E.coli、酵母菌和CHO细胞宿主DNA为模板,制备地高辛
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目的建立原核生物[大肠杆菌(E.coli)]和真核生物(酵母菌和CHO细胞)宿主DNA残留的检测方法,并比较检测方法的灵敏度。方法以E.coli、酵母菌和CHO细胞宿主DNA为模板,制备地高辛标记的探针。将探针与宿主DNA进行杂交后采用底物显色法显色,建立3种生物宿主DNA残留检测方法,并比较温度对检测方法灵敏度的影响。结果建立了E.coli、酵母菌和CHO细胞宿主DNA的检测方法,灵敏度高达10 pg;同一条件下真核生物宿主DNA残留检测方法的灵敏度要高于原核生物。结论该检测方法具有灵敏度高、准确性好、操作简便等优势,可用于E.coli、酵母菌和CHO细胞宿主DNA残留的检测及质量控制。
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