【摘 要】
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目的 探究牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)在受到牵张力作用下的成骨分化能力及其内质网线粒体偶联的变化.方法 从牙周膜分离原代PDLSCs并进行传代培
【机 构】
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西安交通大学口腔医学院正畸科,陕西西安710004;第四军医大学口腔医学院组织工程中心,陕西西安710032;第四军医大学口腔医学院组织工程中心,陕西西安710032;军事口腔医学国家重点实验室,口腔
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目的 探究牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)在受到牵张力作用下的成骨分化能力及其内质网线粒体偶联的变化.方法 从牙周膜分离原代PDLSCs并进行传代培养,使用第3代细胞以施加或不施加牵张力处理分别作为实验组和对照组,并在加力后收取细胞进行成骨诱导培养,采用茜素红染色和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测PDLSCs成骨分化水平和成骨相关基因[Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(OCN)、碱性磷酸酶(ALP)]的表达水平.用透射电镜观察线粒体内质网的空间接触变化,采用qRT-PCR检测线粒体融合蛋白-1(mitofusion 1,Mfn1)和线粒体融合蛋白-2(mitofusion2,Mfn2)的基因表达水平,采用线粒体膜电位检测试剂盒检测PDLSCs线粒体膜电位变化.结果 茜素红染色和qRT-PCR检测结果显示,施加牵张力后PDLSCs的成骨分化能力显著增强(P＜0.05).透射电镜结果显示,与时照组相比,实验组PDLSCs内质网线粒体偶联长度与线粒体周长之比显著降低(P＜0.05).实验组细胞Mfn2基因表达水平较对照组显著降低(P＜0.05),但两组Mfn1基因表达变化差异无统计学意义(P＞0.05).实验组细胞线粒体膜电位与对照组相比则显著升高(P＜0.05).结论 施加牵张力可促进PDLSCs的成骨分化,其机制可能与抑制PDLSCs内质网线粒体的偶联、升高线粒体膜电位趋势有关.
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