【摘 要】
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目的为了进一步研究ISLI作为第二生心区心脏前体细胞的分子标志在心脏发育中的功能，需要获得ISL1蛋白并制备其抗体。方法根据已报道的ISL1基因序列，以癍马鱼mRNA为模板进行PCR
【机 构】
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湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（31172044）,湖南省杰出青年科学基金（10JJ1006）,湖南省教育厅优秀青年科技计划项目（11B079）.
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目的为了进一步研究ISLI作为第二生心区心脏前体细胞的分子标志在心脏发育中的功能，需要获得ISL1蛋白并制备其抗体。方法根据已报道的ISL1基因序列，以癍马鱼mRNA为模板进行PCR扩增得到ISL1部分编码区序列，然后将其连接到pET-28a载体上获得原核表达载体。将重组质粒进行酶切测序鉴定，然后利用大肠杆菌E．co1iBL21对该重组质粒进行表达。经过IPTG诱导，采用Ni-IDA凝胶柱亲和纯化，将纯化的his-ISL1融合蛋白免疫新西兰大白兔制备ISL1多克隆抗体，并用WesternB1ot检测抗体效
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