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摘要：本试验以丰香草莓组培苗叶片为试材，研究了离体再生过程中激素配比、叶龄、放置方式、暗培养等对不定芽再生效率的影响。
关键词：草莓；叶片离体再生；不定芽
中图分类号：S668.4 文献标识码：A 文章编号：1674-0432（2012）-12-0037-1
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试材料为MS培养基上生长健壮、大小一致的继代试管苗，品种为丰香。选取株高3～4cm的无菌苗上刚展开的幼嫩叶片制备外植体。
1.2 接种方法
将叶片剪成3～4mm宽的小条作为外植体。每瓶接8个外植体，每个处理3瓶，2次重复。
1.3 培养条件
培养温度25℃，光照强度2000Lux，光周期12h/d条件下。
2 调查内容与结果分析
2.1 培养基中激素的影响
培养基中的激素种类和浓度是影响叶片再生的重要因子，为了筛选适宜的激素浓度和配比，本实验以MS为基本培养基，附加4类激素组合，即6-BA分别与IBA和NAA，TDZ分别与IBA和NAA。
2.1.1 6-BA 为主要细胞分裂素对叶片再生的影响 培养基中6-BA浓度在0.5～2.0mg·L-1的范围内，草莓叶片的再生芽数随着6-BA浓度的增加而增多，且再生频率也随着6-BA浓度增加而增加（附表略）。生长素中IBA对草莓再生不定芽的效果要好于NAA。综合看来，2.0mg·L-1 6-BA与0.2mg·L-1IBA组合，再生效果均最好。
2.1.2 TDZ为主要细胞分裂素对叶片再生的影响 将叶片接种在含有不同浓度TDZ的MS培养基上，试验结果（附表略）表明：随着TDZ浓度的增加，再生频率及每个外植体平均再生芽数均有提高的趋势；但随着TDZ浓度都增加，玻璃化现象也开始严重。总体来看，1.5mg·L-1 TDZ与0.2、0.4mg·L-1 IBA组合都效果最好。
在以TDZ为主要细胞分裂素的培养基上，草莓叶片的再生频率最高可达98.66%，再生芽数最高可达到10.84，表明用TDZ代替6-BA能够明显提高草莓叶片再生不定芽的效率。
2.2 不同叶龄的影响
分别选取0、20、30及40d叶龄的叶片，接种培养50d后进行观察。结果表明（表1）叶龄对不定芽诱导有明显影响。叶龄在30d时，叶片再生能力最强，叶片再生频率最高，在60%以上。当叶龄超过30d，再生率开始下降，大部分外植体，逐渐黄化变黑，乃至枯死。
2.3 叶片不同放置方式的影响
设置叶片正面和反面接触培养基两个处理，两种方式的再生频率分别为60.42%和75%，而两处理外植体的再生芽分别平均为4.31颗和4.39颗，草莓的叶片再生培养以叶正面向上放置为好。
2.4 暗培养的影响
本试验对外植体分别进行0、7、14、21d的暗培养，从表2中可以看出，草莓叶片材料经暗培养处理后再置于光下培养，随着暗培养时间的增加，不定芽的再生率和再生芽数逐渐提高，暗培养21d，有利于叶片不定芽分化。
作者简介：冯波（1974-），男，辽宁阜新人，阜新市农业广播电视学校高级农艺师，研究方向：农业。
关键词：草莓；叶片离体再生；不定芽
中图分类号：S668.4 文献标识码：A 文章编号：1674-0432（2012）-12-0037-1
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试材料为MS培养基上生长健壮、大小一致的继代试管苗，品种为丰香。选取株高3～4cm的无菌苗上刚展开的幼嫩叶片制备外植体。
1.2 接种方法
将叶片剪成3～4mm宽的小条作为外植体。每瓶接8个外植体，每个处理3瓶，2次重复。
1.3 培养条件
培养温度25℃，光照强度2000Lux，光周期12h/d条件下。
2 调查内容与结果分析
2.1 培养基中激素的影响
培养基中的激素种类和浓度是影响叶片再生的重要因子，为了筛选适宜的激素浓度和配比，本实验以MS为基本培养基，附加4类激素组合，即6-BA分别与IBA和NAA，TDZ分别与IBA和NAA。
2.1.1 6-BA 为主要细胞分裂素对叶片再生的影响 培养基中6-BA浓度在0.5～2.0mg·L-1的范围内，草莓叶片的再生芽数随着6-BA浓度的增加而增多，且再生频率也随着6-BA浓度增加而增加（附表略）。生长素中IBA对草莓再生不定芽的效果要好于NAA。综合看来，2.0mg·L-1 6-BA与0.2mg·L-1IBA组合，再生效果均最好。
2.1.2 TDZ为主要细胞分裂素对叶片再生的影响 将叶片接种在含有不同浓度TDZ的MS培养基上，试验结果（附表略）表明：随着TDZ浓度的增加，再生频率及每个外植体平均再生芽数均有提高的趋势；但随着TDZ浓度都增加，玻璃化现象也开始严重。总体来看，1.5mg·L-1 TDZ与0.2、0.4mg·L-1 IBA组合都效果最好。
在以TDZ为主要细胞分裂素的培养基上，草莓叶片的再生频率最高可达98.66%，再生芽数最高可达到10.84，表明用TDZ代替6-BA能够明显提高草莓叶片再生不定芽的效率。
2.2 不同叶龄的影响
分别选取0、20、30及40d叶龄的叶片，接种培养50d后进行观察。结果表明（表1）叶龄对不定芽诱导有明显影响。叶龄在30d时，叶片再生能力最强，叶片再生频率最高，在60%以上。当叶龄超过30d，再生率开始下降，大部分外植体，逐渐黄化变黑，乃至枯死。
2.3 叶片不同放置方式的影响
设置叶片正面和反面接触培养基两个处理，两种方式的再生频率分别为60.42%和75%，而两处理外植体的再生芽分别平均为4.31颗和4.39颗，草莓的叶片再生培养以叶正面向上放置为好。
2.4 暗培养的影响
本试验对外植体分别进行0、7、14、21d的暗培养，从表2中可以看出，草莓叶片材料经暗培养处理后再置于光下培养，随着暗培养时间的增加，不定芽的再生率和再生芽数逐渐提高，暗培养21d，有利于叶片不定芽分化。
作者简介：冯波（1974-），男，辽宁阜新人，阜新市农业广播电视学校高级农艺师，研究方向：农业。