转马铃薯Y病毒复制酶基因烟草的获得及抗病性分析

来源 :中国烟草科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:michael8363
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重组克隆DNA用KpnI/BamHI双酶切得到马铃薯Y病毒NIb基因,将其插入质粒pROK2相应切点中构成植物表达载体。用重组质粒pROK2转化农杆菌(Agrobacteriumtumefa-ciens)LBA4404菌株,叶盘法将NIb基因转入烤烟品种NC89的染色体,获得抗卡那霉素的转化再生植株。经抗性筛选、PCR检测、无性扩繁和大量重复抗病鉴定,结果表明,转化烟草植株DNA中整合了外源目的基因,且表现抵抗20μg/mlPVYN的侵染,ELISA分析认为抗性植株无病毒累积,初步筛选出对PVYN侵染具有
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