【摘 要】
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目的分离鉴定在肝癌细胞HepG2和Hep3B中与骨桥蛋白(OPN)5′非翻译区(5′-UTR)结合后在转录后水平调节OPN mRNA的稳定性的mRNA结合蛋白。方法利用亲和纯化的方法分离和纯化OPN 5′
【机 构】
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郑州人民医院消化内科,郑州大学第一附属医院消化内科
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目的分离鉴定在肝癌细胞HepG2和Hep3B中与骨桥蛋白(OPN)5′非翻译区(5′-UTR)结合后在转录后水平调节OPN mRNA的稳定性的mRNA结合蛋白。方法利用亲和纯化的方法分离和纯化OPN 5′UTR结合蛋白,质谱分析消化后的片段以鉴定蛋白;Hep3B细胞瞬时转染真核细胞翻译延长因子1A(EF1A)siRNA抑制EF1A,HepG2细胞瞬时转染(pcDNA3.1+EF1A)质粒过表达EF1A,Western blot检测OPN蛋白的表达,real-time PCR检测OPN mRNA半衰期的变化
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