【摘 要】
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目的 旨在探讨miR-142-3p在M5刺激人表皮角质形成细胞HaCaT中的作用及潜在机制.方法 MTT法检测细胞增殖;ELISA凋亡检测试剂盒评估细胞凋亡.ELISA试剂盒测定炎症介质TNF-α、I
【机 构】
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西安交通大学医学院第二附属医院皮肤科,陕西西安710004
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目的 旨在探讨miR-142-3p在M5刺激人表皮角质形成细胞HaCaT中的作用及潜在机制.方法 MTT法检测细胞增殖;ELISA凋亡检测试剂盒评估细胞凋亡.ELISA试剂盒测定炎症介质TNF-α、IL-22和IL-17A的分泌量.RT-PCR和Western blot分别测定目的基因mRNA和蛋白表达.荧光素酶报告实验评估荧光素酶活性.结果 M5刺激的HaCaT细胞中miR-142-3p表达升高.下调miR-142-3p显著抑制M5诱导HaCaT细胞的增殖并促进凋亡,抗凋亡蛋白Bcl-2减少,伴随促凋亡蛋白Bax增加.此外,下调miR-142-3p通过降低多种炎症因子的表达改善M5诱导的炎症反应.重要的是,miR-142-3p负调控靶基因Sema3A的表达.从机制上讲,沉默Sema3A有效逆转miR-142-3p下调对HaCaT细胞的抗增殖、促凋亡及抗炎作用.结论 下调miR-142-3p通过调控靶基因Sema3A保护HaCaT细胞免受M5诱导的过度增殖和炎症损伤,揭示miR-142-3p/Sema3A轴可能是防止角质形成细胞损伤的新靶点.
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