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构建猪IFN-β重组真核表达质粒pcDNA3.1-PoIFN-β，转染悬浮培养的CHO细胞，进行上清分泌表达；通过CHO细胞表达系统，成功分泌表达和制备纯化的rPoIFN-β。通过CCK-8试验，分析rPoIFN-β对细胞的毒性，结果显示纯化的rPoIFN-β对细胞无明显毒性；采用VSV/PK-15系统检测rPoIFN-β抗病毒活性效价，结果显示其抗病毒活性效价为4.54×10~7U/mg；制备的rPoIFN-β可显著抑制O型和A型FMDV在PK-15细胞的复制，表现出较强的抗病毒活性；通过分析rPoIFN-β对细胞ISGs的诱导作用，发现rPoIFN-β能够显著刺激12种ISGs的表达。研究结果表明，本试验制备纯化的rPoIFN-β具有较低的细胞毒性和较高的抗病毒活性效价，为口蹄疫防控制剂的开发和研究提供了基础数据。