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[目的]利用分子克隆技术,构建一套体外miRNA/mRNA-3’UTR interactions reporter system并鉴定其功能。[方法]分别以质粒plRES2-EGFP、pGL3-Control为模板PCR扩增EGFP,Luciferase编码序列,并依次在5’,3’添加酶切位点XhoⅠ、HindⅢ,定向克隆到pBlue-script—KS(-)中的多克隆位点中,利用该载体中的多克隆位点序列使用XhoⅠ、NotⅠ酶切获取3’带有一段常用酶切位点的多克隆序列,最后定向克隆到plRES2.EGF