【摘 要】
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目的 观察感染小鼠甲胎蛋白(mAFP)和4-1BB配体(m4-1BBL)融合基因对小鼠树突状细胞(DC)生物学特性的影响.方法 构建含mAFP和m4-1BBL的融合基因腺病毒Ad-mAFP-内部核糖体起始位点(IRES)-m4-1BBL,感染H22肝癌细胞,Western blot法检测mAFP和4-1BBL蛋白的表达；诱导培养DC,并将其分为实验组、载体对照组和阴性对照组,以上各组感染后观察DC
【机 构】
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430060武汉大学人民医院普外科,430060武汉大学人民医院泌尿外科
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目的 观察感染小鼠甲胎蛋白(mAFP)和4-1BB配体(m4-1BBL)融合基因对小鼠树突状细胞(DC)生物学特性的影响.方法 构建含mAFP和m4-1BBL的融合基因腺病毒Ad-mAFP-内部核糖体起始位点(IRES)-m4-1BBL,感染H22肝癌细胞,Western blot法检测mAFP和4-1BBL蛋白的表达；诱导培养DC,并将其分为实验组、载体对照组和阴性对照组,以上各组感染后观察DC形态学变化；流式细胞仪检测各组细胞表型；混合淋巴细胞反应(MLR)检测各组DC的刺激活性以及对T细胞分泌干扰素(IFN)-γ的影响.结果 成功构建融合基因重组腺病毒Ad-mAFP-IRES-m4-1BBL并表达于H22细胞；体外诱导培养获得典型的DC；流式细胞仪检测各组DC感染后的细胞表型,实验组DC细胞CD80[(60.7±8.7)％]、CD86[(67.0±4.6)％]表达率显著增高于其余两组(P＜0.05),刺激T细胞增殖能力(0.66±0.05)亦显著增强(P＜0.05),刺激T细胞分泌IFN-γ[(1280.7 ±68.2) ng/L]水平更高(P＜0.05).结论 成功构建含mAFP及4-1BBL融合基因腺病毒疫苗,其感染DC后刺激T细胞增殖和分泌IFN-γ的能力增强。
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