【摘 要】
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目的 探讨亲和层析法纯化抗前胃泌素释放肽(PGRP)单克降抗体(MAb)的效果,为该法纯化其他抗体提供数据依据.方法 采用蛋白A-琼脂糖亲和层析法纯化含有MAb的腹腔积液,并用SDS-P
【机 构】
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中国辐射防护研究院放射与环境医学研究所放射医学研究室,苏州大学附属第二医院核医学科
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目的 探讨亲和层析法纯化抗前胃泌素释放肽(PGRP)单克降抗体(MAb)的效果,为该法纯化其他抗体提供数据依据.方法 采用蛋白A-琼脂糖亲和层析法纯化含有MAb的腹腔积液,并用SDS-PAGE和酶联免疫吸附(ELISA)法分别检测其纯度和效价,用流式细胞术和免疫组织化学法榆测其对小细胞肺癌细胞株NCI-H446的组织切片的生物功能.结果 亲和层析法纯化前小鼠腹腔积液蛋白质质量浓度平均为23.62 mg/ml;纯化前、后蛋白总量分别为148.79和146.67 mg,回收率为98.58%.腹腔积液中MAb质量浓度平均为5.21 mg/ml;纯化的MAb纯度达95%以上.纯化后抗体免疫学活性均高于纯化前,提高了6.90～15.40倍.结论 蛋白A-琼脂糖亲和层析法可快速、高效地从小鼠腹腔积液中纯化抗PGRP MAb,且抗体具有较高的纯度,免疫学活性明显提高,能够选择性的和小细胞肺癌细胞的PGRP结合.
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