【摘 要】
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探讨芍药苷对人急性B淋巴细胞白血病(B-cell acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)细胞凋亡、周期的影响及作用机制。体外培养Nalm-6和SUP-B15细胞,设对照组(0 μg·mL-1)及芍药苷不同剂量组(200、400、800 μg·mL-1)。细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测Nalm-6和SUP-B15细胞活力;流式
【机 构】
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西南医科大学附属医院儿科儿童血液肿瘤与出生缺陷实验室
【基金项目】
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四川省应用基础研究项目(2019YJ0690); 四川省中医药管理局科学技术研究专项(2020JC0135);
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探讨芍药苷对人急性B淋巴细胞白血病(B-cell acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)细胞凋亡、周期的影响及作用机制。体外培养Nalm-6和SUP-B15细胞,设对照组(0 μg·mL-1)及芍药苷不同剂量组(200、400、800 μg·mL-1)。细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测Nalm-6和SUP-B15细胞活力;流式细胞术分析细胞凋亡和细胞周期分布;免疫印迹法检测活化的半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、活化的多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved poly ADP-ribose polymerase, cleaved PARP)、c-Myc和小泛素样修饰物特异性蛋白酶1(small ubiquitin-like modifier-specific protease 1, SENP1)蛋白的表达情况;基于Oncomine数据库分析ALL患者中c-Myc和SENP1基因mRNA的表达水平;采用AutoDock软件进行分子对接分析芍药苷与c-Myc和SENP1蛋白的相互作用关系。结果显示,芍药苷抑制Nalm-6和SUP-B15细胞活力,并呈浓度和时间依赖性;与对照组比较,芍药苷显著上调凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、cleaved PARP的表达,诱导Nalm-6和SUP-B15细胞凋亡;显著增加Nalm-6和SUP-B15细胞G2/M期细胞比例,诱导G2/M期阻滞;显著下调Nalm-6和SUP-B15细胞c-Myc和SENP1蛋白的表达水平。ALL患者中c-Myc和SENP1基因mRNA表达水平较正常组显著增加。分子对接显示,芍药苷与c-Myc和SENP1蛋白均具有良好的结合作用。综上,芍药苷通过诱导细胞凋亡和G2/M期阻滞抑制Nalm-6和SUP-B15细胞增殖,其机制可能与c-Myc和SENP1蛋白下调有关。
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