从少量培养细胞中同时提取微量蛋白和RNA的方法探讨

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaoxianjihuoma
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为建立一项从少量培养细胞中同时提取RNA和蛋白质的技术,向 2~3×105细胞中加入1 ml自制RNA提取试剂, RNA抽提后剩下的中下两相,用异丙醇、盐酸胍和无水乙醇抽提蛋白质.同时用进口Tripure试剂、经典的异硫氰酸胍-苯酚-氯仿一步抽提RNA法和分子克隆实验手册裂解液制备蛋白质的方法,作为对照.自制试剂提取的总RNA,18 S、28 S清晰可见,28 S比18 S带亮度强2~3倍,带与带之间无拖尾现象,5 S隐约可见,而且成功地进行了Northern 印迹、RT-PCR分析,与经典方法
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