【摘 要】
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目的 探讨Notch信号通路与胶质瘤细胞上皮间充质转化的关系.方法 采用免疫磁珠法从人脑胶质瘤组织分离脑胶质干细胞,进行体外培养,使用免疫荧光技术鉴定细胞;构建Notch-1基因
【机 构】
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056016,邯郸市第二医院神经外科邯郸市第三医院外眼病科;邯郸市中心医院神经外一科;邯郸市中心医院小儿内科;
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目的 探讨Notch信号通路与胶质瘤细胞上皮间充质转化的关系.方法 采用免疫磁珠法从人脑胶质瘤组织分离脑胶质干细胞,进行体外培养,使用免疫荧光技术鉴定细胞;构建Notch-1基因的RNA干扰反转录病毒载体(pSiRNA-Notch-1),试验分为3组,空白对照组(不转染质粒)、阴性对照组(转染空白质粒)和干扰组(转染pSiRNA-Notch-1),观察3组细胞增殖、分化,采用RT-PCR和Western blot检测Notch-1和Hes-1 mRNA和蛋白表达.结果 干扰组培养第7天细胞增殖及细胞分化吸光度值(A)分别为(1.332±0.614)和(1.203±0.783),明显低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);细胞增殖培养3 d后,干扰组Notch-1和Hes-1 mRNA和蛋白相对表达量分别为(0.189±0.021)和(0.301±0.121),(0.422±0.022)和(0.091±0.032),明显低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);细胞分化培养3 d后,干扰组Notch-1和Hes-1 mRNA和蛋白相对表达量分别为(0.253±0.071)和(0.192±0.043),(0.178±0.022)和(0.101±0.012),明显低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05).结论 Notch信号通路在胶质瘤细胞增殖分化过程中有重要作用,其中Notch-1和Hes-1可能参与了增殖、分化的调控,需进一步研究.
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