【摘 要】
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目的 建立竞争酶联免疫吸附法(ELISA)用以检测大鼠尿金属硫蛋白(UMT)的含量.方法 用标准MT抗原包被酶标板,加入待测样品或标准MT与包被MT竞争鼠抗MT抗体(一抗).再加入生物素
【机 构】
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复旦大学公共卫生学院劳动卫生教研室
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划);
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目的 建立竞争酶联免疫吸附法(ELISA)用以检测大鼠尿金属硫蛋白(UMT)的含量.方法 用标准MT抗原包被酶标板,加入待测样品或标准MT与包被MT竞争鼠抗MT抗体(一抗).再加入生物素化抗大鼠IgG(二抗)与一抗进行反应,然后在二抗联与亲和素化辣根过氧化物酶使底物显色,根据吸光度值计算样品浓度.结果 该方法在150～2.34μg/ml间线性关系良好(r=0.9899);批内精密度为3.38%～6.43%,批间精密度为5.32%～9.38%;加标回收率为90.13%～96.40%;雄性和雌性大鼠UMT含量分别为17.74μg/mgCr和15.97μg/mg Cr.结论 该方法简便,灵敏,具有较好的精密度和准确度,可用于大鼠UMT的检测.正常大鼠尿中含有MT,但雄性和雌性大鼠之间UMT无明显差异.
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