【摘 要】
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目的: 构建针对增强型(EGFP)的pSUPER siRNA(small interferencing RNA)表达载体,并在哺乳动物细胞COS-7细胞中观察其干扰效果.方法: 设计针对EGFP编码区的寡核苷酸链,体外退
【机 构】
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第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,第四军医大学基础部免疫学教研室,第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划)，国家高技术研究发展计划(863计划)，国家自然科学基金
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目的: 构建针对增强型(EGFP)的pSUPER siRNA(small interferencing RNA)表达载体,并在哺乳动物细胞COS-7细胞中观察其干扰效果.方法: 设计针对EGFP编码区的寡核苷酸链,体外退火后克隆入经BglⅡ和HindⅢ双酶切线性化的干扰载体pSUPER中,对重组质粒进行酶切分析和DNA序列测定.通过脂质体介导,将重组干扰质粒与pIRESE2-EGFP瞬时共转染COS-7细胞,48 h后荧光显微镜下观察干扰效果.结果: 经酶切鉴定及DNA序列测定证实,重组质粒中已插入了目的
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