Cyr61真核表达载体构建及在人原代培养软骨细胞中的表达研究

来源 :医学研究杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zht336

【摘要】

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目的通过体外原代培养获得人软骨细胞，将重组真核表达载体pcDNA3．1-cyr61转染人软骨细胞，探讨外源性cyr61在软骨细胞中的表达效应。方法应用机械分离联合胶原酶消化法，原代培养获

【作者】

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朱敏潘伟波洪盾王晨汪志军范厉龙吕海燕

【机构】

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温州医学院附属台州医院

【出处】

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医学研究杂志

【发表日期】

：

2013年7期

【关键词】

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软骨细胞原代培养 CYR61 基因转染组织工程 Chondrocyte Primary culture Cyr61 Gene transfect

【基金项目】

：

台州市科技基金资助项目（08KYl5）

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目的通过体外原代培养获得人软骨细胞，将重组真核表达载体pcDNA3．1-cyr61转染人软骨细胞，探讨外源性cyr61在软骨细胞中的表达效应。方法应用机械分离联合胶原酶消化法，原代培养获得人软骨细胞，镜下观察及扫描电镜分析软骨细胞形态，Ⅱ型胶原（CollagenⅡ）免疫细胞化学及甲苯胺蓝染色鉴定软骨细胞表型；构建pcDNA3．1-cyr61真核表达载体，Fugene介导转染人软骨细胞，Westernblot验证其表达效应；RT-PCR检测重组质粒转染后软骨细胞CollagenⅡ、聚集蛋白聚糖（Aggrec

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