草鱼呼肠孤病毒vp5基因诱饵重组载体的构建、转化与自激活作用检测

来源 :广东海洋大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：nish2008

【摘要】

：

根据草鱼呼肠孤病毒（GrassCarpReovirus，GCRV）的vp5基因设计特异性引物，并扩增其开放阅读框序列（openreadingframe，ORF），然后连接至pGBKT7载体上构建酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-vp5，转

【作者】

：

谢吉国闫秀英简纪常吴灶和

【机构】

：

广东海洋大学水产学院,仲恺农业工程学院

【出处】

：

广东海洋大学学报

【发表日期】

：

2012年3期

【关键词】

：

草鱼呼肠孤病毒酵母双杂交系统诱饵载体自激活性 Grass Carp Reovirus （GCRV） yeast two-hybrid system b

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根据草鱼呼肠孤病毒（GrassCarpReovirus，GCRV）的vp5基因设计特异性引物，并扩增其开放阅读框序列（openreadingframe，ORF），然后连接至pGBKT7载体上构建酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-vp5，转化至酵母茵Y2HGold，并进行PCR鉴定以及自激活性和毒性检测。PCR、酶切以及测序表明，pGBKT7-vp5重组诱饵载体构建成功。自激活性和毒性检测显示，阳性重组菌株pGBKT7-vp5/Y2HGold和阴性对照菌株pGBKT7／Y2HGold在SD／-Trp平板上出现

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