【摘 要】
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目的 探讨PFXYD序列在phospholemman(PLM)调节L型钙通道中的作用.方法用丙氨酸(Ala/A)替换组成PFXYD序列的5个氨基酸,得到突变型PLM-ALL5.用磷酸钙沉淀法将编码L型钙通道的cD
【机 构】
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武汉大学人民医院心内科,美国宾夕法尼业州立大学米尔顿郝尔希医学中心细胞与分子生理系
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目的 探讨PFXYD序列在phospholemman(PLM)调节L型钙通道中的作用.方法用丙氨酸(Ala/A)替换组成PFXYD序列的5个氨基酸,得到突变型PLM-ALL5.用磷酸钙沉淀法将编码L型钙通道的cDNA分别与编码载体质粒(empty vector,EV)、野生型PLM(wild type,WT)、突变型PLM(ALL5)的cDNA转染到HEK 293细胞中,待其表达相应蛋白后,用全细胞膜片钳方法记录L型钙电流(ICa(L))并分析其动力学特性.结果 在除极化电位为-20 mV和-10 mV时,ALL5较WT更加明显地减慢了ICa(L)激活速度,而在相同电位下ALL5使ICa(L)失活速度也明显减慢;与WT相反,ALL5没有减慢ICa(L)灭活速度,反使其加快了;以上ALL5所致的ICa(L)改变与电流大小无关.结论 PFXYD序列理化性质的改变可以引起PLM对L型钙通道调节作用的改变,提示PFXYD序列在PLM调节L型钙通道的过程中发挥重要作用.
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