【摘 要】
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采用显微注射法,将一个由1.3kb人感光细胞间维生素A类结合蛋白(hIRBP)启动子区和人血管内皮生长因子(hVEGF183)cDNA所构成的融合基因片段HIRV183导入289枚ICR小鼠受精卵的雄
【机 构】
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中国药科大学生物制药学院,扬州大学兽医学院,美国北德州健康科学中心
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采用显微注射法,将一个由1.3kb人感光细胞间维生素A类结合蛋白(hIRBP)启动子区和人血管内皮生长因子(hVEGF183)cDNA所构成的融合基因片段HIRV183导入289枚ICR小鼠受精卵的雄性原核.制备当代(G0)转基因小鼠,共得G0代小鼠17只.经PCR和PCR-Southern方法筛选得到1只为hVEGF183转基因阳性小鼠,整合率为5.9%,转基因总效率为0.3%.将其与正常ICR小鼠交配,经PCR和dot-blot杂交鉴定后代(F1)小鼠阳性整合率为45.9%.F1代兄妹之间进行交配,后代(F2)小鼠阳性整合率为67.6%.结果表明,外源基因hVEGF183整合在小鼠染色体的单一位点,为以后利用转基因动物的方法对VEGF这个新型异构体VEGF183进行深入研究打下了基础.
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