【摘 要】
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目的 基于“肾脑相关”理论,探究龟龄集对氢化可的松与 β 淀粉样蛋白(Aβ)诱导的阿尔茨海默病模型大鼠的作用,并利用代谢组学的方法探讨其相关作用机制.方法 采用ip氢化可的松与icv Aβ 诱导的阿尔茨海默病模型,选用SD雄性大鼠60只,分为对照组、模型组、假手术组和龟龄集低、中、高剂量组.行为学实验结束后,麻醉取血、肾上腺、脾、肾、胸腺、睾丸、脑和海马,计算肾上腺指数及肾脏指数.采用新物体识别实验、Morris水迷宫实验检测药物干预对大鼠认知功能的影响.酶联免疫试剂盒(ELISA)法检测各组组织上清液中
【机 构】
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山西中医药大学中药与食品工程学院,山西 晋中 030619;中药炮制山西省重点实验室,山西 晋中 030619;山西广誉远国药有限公司,山西 晋中 030800
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目的 基于“肾脑相关”理论,探究龟龄集对氢化可的松与 β 淀粉样蛋白(Aβ)诱导的阿尔茨海默病模型大鼠的作用,并利用代谢组学的方法探讨其相关作用机制.方法 采用ip氢化可的松与icv Aβ 诱导的阿尔茨海默病模型,选用SD雄性大鼠60只,分为对照组、模型组、假手术组和龟龄集低、中、高剂量组.行为学实验结束后,麻醉取血、肾上腺、脾、肾、胸腺、睾丸、脑和海马,计算肾上腺指数及肾脏指数.采用新物体识别实验、Morris水迷宫实验检测药物干预对大鼠认知功能的影响.酶联免疫试剂盒(ELISA)法检测各组组织上清液中睾酮和皮质酮(CORT)含量.蛋白质免疫印迹法(Western blotting)法测定大鼠海马组织中蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的表达水平.利用非靶向代谢组学方法,筛选出用药前后潜在代谢差异物并进行通路分析,找到与龟龄集治疗阿尔茨海默病模型大鼠所涉及的相关代谢通路.结果 新物体识别结果显示,与对照组相比,模型组新物体辨别指数(RI)显著降低(P<0.05);与模型组相比,龟龄集高、中剂量组新物体RI显著升高(P<0.05).Morris水迷宫实验显示,与模型组相比,龟龄集高、中、低剂量组大鼠在Ⅲ象限路程、Ⅲ象限时间显著延长(P<0.05).与模型组相比,龟龄集低、中、高剂量组肾脏指数和龟龄集高剂量肾上腺指数均显著升高(P<0.01).血清激素水平结果显示:与模型组相比,龟龄集高、中、低剂量组CORT显著降低(P<0.05).Western blotting结果显示,与模型组相比,p-Akt/Akt龟龄集高、中、低剂量组表达水平均显著升高(P<0.05、0.01).用药前后共得到23种血清差异代谢物水平发生不同程度的回调,主要涉及代谢途径为甜菜碱代谢、初级胆汁酸的生物合成、磷脂生物合成等代谢途径.结论 龟龄集对氢化可的松与Aβ 诱导的阿尔茨海默病模型大鼠可明显改善认知功能障碍,保护脑组织海马结构,改善模型大鼠血清中C O RT和睾酮水平.还可以通过调节阿尔茨海默病模型大鼠的整体代谢水平.
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