维生素C促进高糖环境下人脂肪干细胞的增殖及相关机制

来源 :中国组织工程研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aa377059590
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背景:研究证实,维生素C除了具有抗氧化作用外,还具有促进细胞增殖的重要作用,但至今为止,有关维生素C对高糖环境下人脂肪干细胞的增殖作用及相关分子机制尚不明确。目的:研究维生素C促进高糖环境下人脂肪干细胞增殖的作用及相关分子机制。方法:取高塘环境中培养的第3代人脂肪干细胞,分别以0,100,150,200,250,300μmol/L维生素C处理,以低糖环境中培养的细胞为对照,MTT法筛选最佳维生素C干预浓度及处理时间,进行Western Blot检测。EdU检测:将高糖环境中培养的人脂肪干细胞分4组培养,空白对照组不进行任何干预,维生素C组加入最佳浓度维生素C,LY294002组加入PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002与最佳浓度维生素C,U0126组加入ERK/MAPK信号通路抑制剂U0126与最佳浓度维生素C,以低糖环境中培养的细胞为对照,干预48 h后,检测Ed U标记阳性细胞数。结果与结论:(1)CCK-8法检测:200μmol/L维生素C促进高糖环境下人脂肪干细胞的增殖作用最强,所以此为最佳干预浓度,最佳处理时间为48 h;(2)Western Blot检测:对照组、0μmol/L维生素C处理组、200μmol/L维生素C处理组p-AKT蛋白表达无差异,200μmol/L维生素C处理组p-ERK蛋白表达高于0μmol/L维生素C处理组(P<0.01);(3)Ed U检测:维生素C组、LY294002组、对照组EdU标记阳性细胞数高于空白对照组(P<0.01),维生素C组EdU标记阳性细胞数高于U0126组(P<0.01);(4)结果表明:维生素C通过ERK/MAPK信号通路促进高糖环境下人脂肪干细胞的增殖。
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