基因治疗对常用治疗方法难以解决的单基因疾病、癌症、心血管疾病等往往具有良好的疗效.迄今为止,已有超过2000例的基因治疗应用于临床试验[1],在基因治疗临床试验中超过68%是应用病毒载体.腺相关病毒(AAV)载体由于其基因传递效率高,缺乏致病性和具有良好的安全性而备受青睐[2].三十多年来,许多应用AAV的基因治疗临床试验取得了成功,rAAV成为人类临床试验的最佳载体之一[3,4,5],但是我们仍然不能忽视基因治疗的安全性问题.本综述旨在比较全面地探讨针对rAAV的免疫反应、rAAV与载体整合等安全性问题.1 rAAV载体的免疫反应 截止到2017年2月,全世界已有173项以rAAV作为基因载体的临床研究(http://www.abedia.c om/wiley/).在这些临床前和临床试验中,免疫反应常常影响rAAV的基因治疗效果.rAAV的转基因产物和衣壳蛋白等都是潜在的抗原[6].人类复杂的免疫系统与这些因素相互作用,成为获得高转导效率和取得长期治疗效果的主要障碍.1.1 针对rAAV载体的固有免疫反应 研究表明,胞嘧啶脱氨基酶家族的hA3A蛋白为AAV复制的有效抑制剂[7].人类的hA3A能够绑定病毒单链DNA而干扰其合成.这是目前AAV引起固有免疫的直接证据.补体在AAV引发的免疫反应中扮演着重要的角色,结合补体进化也证实了存在AAV所引起的固有免疫反应[8].在小鼠体内,巨噬细胞在启动AAV介导的固有免疫反应中起到非常重要的作用.然而,单核/巨噬细胞表达的hA3A限制了AAV在该类细胞中的转导[7].此外,A AV衣壳蛋白与补体C3结合可抑制巨噬细胞激活及巨噬细胞对AAV的吞噬[8].上述原因导致了AAV在体内很少有固有免疫.尽管如此,固有免疫是引发获得性免疫的条件,rAAV引发的细胞免疫和体液免疫的存在都说明了AAV引起的固有免疫广泛存在于体内.