生物素标记庆大霉素耐药基因探针

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采用低熔点琼脂糖挖块法回收源自澳大利亚的pDG0103的2.0kb的BamHI-HindⅢ片段(携带2″-0-腺苷转移酶[ANT(2″)]基因)和自建的pBY102的4.9kb的PstI-EcoRI片段。以缺口平移法,用生物素-7-dATP进行标记,制备成探针。通过Southern印迹杂交和菌落原位杂交,证明澳源的Gm-DNA探针与美国的探针同源,而与作者构建的Gm-DNA探针不同源。再以菌落原位杂交法,用生物素标记的上述两种探针分别检测106株庆大霉素(Gm)耐药的细菌,结果表明这些菌株携带的Gm钝化酶
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