【摘 要】
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目的 探讨miR-145-5p靶向调控激活转录因子1(ATF1)对人乳腺癌MCF7细胞凋亡的影响.方法 运用TargetScan在线分析miR-145-5p与ATF1的相关性;将ATF1的3'UTR构建进PMIR-RB-REPORT
【机 构】
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邯郸市第二医院,河北邯郸056001
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目的 探讨miR-145-5p靶向调控激活转录因子1(ATF1)对人乳腺癌MCF7细胞凋亡的影响.方法 运用TargetScan在线分析miR-145-5p与ATF1的相关性;将ATF1的3'UTR构建进PMIR-RB-REPORT质粒,利用荧光素酶报告实验检测miR-145-5p是否靶向调控ATF1;用HiPerFect Transfection Reagent转染miR-145-5p模拟物或miR-145-5p抑制物进乳腺癌MCF7细胞,通过Western blot检测ATF1的表达量和乳腺癌MCF7细胞凋亡标志蛋白表达情况.通过MTT实验和Annexin-V染色分别检测MCF7的增值水平和凋亡水平.结果 miR-145-5p靶向ATF1的3'UTR的193-200区域;过表达miR-145-5p时,ATF1和BCL-2的表达量明显减少,而细胞凋亡相关蛋白P21.和BAX则显著增加(P＜0.05),同时CASPASE9/CLEAVED-CAS9比值显著下降(P＜0.05),MCF7细胞增殖水平降低、凋亡水平上升(P＜0.05);敲低miR-145-5p后,ATF1和BCL-2的表达量显著增加(P＜0.05),而细胞凋亡相关蛋白P21以及BAX的表达量明显减少(P＜0.05),同时CASPASE9/CLEAVED-CAS9的比值明显增加(P＜0.05),MCF7细胞增殖水平增加、凋亡水平下降(P＜0.05).结论 miR-145-5p可能靶向调控ATF1促进乳腺癌细胞MCF7凋亡.
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