基于大肠杆菌蛋白质质谱鉴定的阳离子交换色谱优化研究

来源 :湖北大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lichong0324
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以大肠杆菌蛋白质的胰蛋白酶切产物为研究对象,对蛋白质的提取效率进行初步探讨,重点是对多维色谱分离中常用的强阳离子交换色谱的分离条件,包括缓冲液的种类、pH值,洗脱盐的种类、有机溶剂的比例以及上样量进行了考察和比较.结果表明:功率为400 W ,超声时间为15 min ,蛋白质的提取效率达到最高.在强阳离子交换色谱分离线性上样量范围内,10 mmol/L磷酸二氢钾(pH=3.0)作为缓冲体系,在氯化钾溶液作为洗脱盐、流动相中乙腈的体积分数为30%的条件下进行梯度洗脱时,可获得最佳的分离结果.
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