目的建立高效、特异、简便、快速的四重实时荧光PCR(real-time PCR)检测体系同时检测沙门菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌、大肠杆菌O157:H7 4种常见的主要食源性致病菌。方法从Gen Bank数据库中下载沙门菌侵袭性基因ssaR、金黄色葡萄球菌肠毒素nuc基因、单增李斯特菌的hly A基因、大肠杆菌O157:H7的rfb E基因序列,设计引物和探针,利用HAND系统和多色探针编码技术,通过对PCR反应的组分和条件进行优化,建立针对肉类食品中4种食源性致病菌四重实时荧光PCR体系。结果成功建立了检测肉类食品中4种食源性致病菌四重实时荧光体系,DNA和细菌纯培养的最低检测限达到1~100 fg/PCR和1~6.25 CFU/PCR,特异性均达98%以上。结论本文利用HAND系统和多色探针编码技术相结合,构建了针对4种食源性致病菌四重实时荧光PCR体系。可用于食品中食源性致病菌的快速筛查和食源性疾病暴发的快速诊断。