单个巨噬细胞超氧阴离子水平的定量检测方法

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:langfenggw
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目的:建立单个巨噬细胞超氧阴离子(O2)水平的定量检测方法,从而达到在单细胞内同时检测O2和细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的目的.方法:分离小鼠腹腔巨噬细胞,用NBT还原法显示细胞产生O2的水平,以细胞加入NBT前与染色后的透光强度之比来定量表示该细胞产生O2的量;以荧光探针Fura-2/AM负载细胞检测单细胞内[Ca2+]i.结果:①分别用PMA、OZ刺激细胞并用NBT还原法染色后细胞内均有黑色沉淀,但前者分布均匀而后者所产生沉淀多偏于一侧,呈明显的局域性分布;②用NBT孵育10 min后,细胞
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