Ezrin的原核表达及与其相互作用蛋白的研究

来源 :中国医药生物技术 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xndrz1985
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目的体外筛选人胰腺癌细胞中与Ezrin蛋白相互作用的蛋白。方法提取人胰腺癌Panc-1细胞总RNA,RT-PCR法扩增Ezrin基因。将扩增得到的Ezrin基因片段和pET15b质粒转化E.coli DH5α,获得pET15b-Ezrin重组质粒,双酶切后测序鉴定。将测序正确的重组质粒转化至E.coliB L21-CodonPlus(DE3)-RIL,以异丙基硫代-B-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,对表达产物进行Ni^2+-NTA亲和层析和分子筛纯化后,行SDS-PAGE、MALDI—TOF—MS/M
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