【摘 要】
：
为了高效表达分泌型的猪β-干扰素,将去除信号肽的编码梅山猪β-干扰素成熟多肽基因(mPoIFNβ)插入酵母-大肠杆菌穿梭载体pPIC9K,构建成分泌型重组表达载体pPIC9K-mPoIFNβ。
【机 构】
：
华中农业大学预防兽医学院动物病毒室
【基金项目】
：
国家863计划基金(2002AA245071);湖北省科技攻关(2004AA202B01)资助项目
论文部分内容阅读
为了高效表达分泌型的猪β-干扰素,将去除信号肽的编码梅山猪β-干扰素成熟多肽基因(mPoIFNβ)插入酵母-大肠杆菌穿梭载体pPIC9K,构建成分泌型重组表达载体pPIC9K-mPoIFNβ。将以SalⅠ线性化的pPIC9K-mPoIFNβ用化学方法(LiCl),与鲑鱼精DNA(ssDNA)共转化入毕赤酵母菌株GS115,转化子经MD平板筛选和PCR鉴定后获得阳性菌株,再经高浓度G418筛选到多拷贝菌株。以1%甲醇连续诱导4 d,SDS-PAGE和Western blot检测结果表明:表达产物为22 ku和26 ku的混合物,在GS115中的表达量约为80 mg/L,占分泌型总蛋白的29.4%~30.8%,表明猪β-干扰素基因在毕赤酵母中获得了高效分泌表达。对表达产物进行理化分析发现,重组酵母菌表达的蛋白耐酸(pH2),对热(56℃)部分敏感,并能被特异性的抗猪β-干扰素抗体中和而不与抗猪γ-干扰素抗体反应。以细胞病变抑制法(CPE50)测定干扰素抗病毒活性,在MDBK(牛肾细胞系)中表达的猪β-干扰素的抗VSV比活性达到2.0×106U/mg;对口蹄疫病毒在IBRS-2细胞中的增殖也有明显的抑制作用。
其他文献
当今社会,企业的生存与发展离不开人才效能的发挥,人才效能的发挥依赖于企业引进适合企业发展的员工,企业以何种方式进行招聘,关系着企业的未来发展。在今天这个人才济济的社
<正>随着现代科技尤其是计算机技术、信息技术及网络技术的不断发展,档案管理工作在数字化环境下获得了日新月异的发展。新形势下,如何利用先进的科学技术来长期管理数字化档
<正>机关事业单位档案是其活动的真实记录,存储了许多第一手材料和宝贵的工作经验,既能够反映单位的发展历程,也为单位的改革和管理提供决策依据和经验参考,是档案事业发展的
<正>"档案"一词极大地体现了汉字之艺术性,使人会意出"档案"放置的器具、"保存备查"的作用等,很难找出另一个词汇与之替代。"档案"词源的探析一直是档案史研究的一个重要课题
检测热应激后猪血清中的IL-2、IFN-γ及TNF-α水平,观察其变化规律。将12头体重基本一致的3月龄中国试验用小型猪随机分成高温试验组和常温对照组两组。高温试验组在人工气候
对于难以索解的词语,语言使用者根据自己熟悉的事物去曲解其词形和词义,从而形成流俗词源。流俗词源不仅发生于难解的技术用词和外来词,而且涉及到普通的本族词。我们可以把
采用极化曲线、电化学交流阻抗等技术对X70钢在含水量20%~34%(质量分数)的大港滨海盐渍土中的腐蚀行为进行研究.结果表明:土壤含水量对X70钢腐蚀行为影响显著;水质量分数为25
1月12日，习近平总书记在十八届中央纪委六次全会上的重要讲话中，强调抓作风建设要返璞归真、固本培元，在加强党性修养的同时，弘扬中华优秀传统文化。领导干部要把家风建设摆在重
<正>要想实现不良资产回收价值最大化,创造更多的经济增加值,银行的不良资产清收、处置工作必须向价值创造型的发展方式加快转变,因时而变,顺势而为,树立适应现代股份制商业
为了有效利用稀缺的地质资源,建立了以净现值(NPV)为目标函数的矿床经济评价模型.采用盈利法计算伴生元素的当量品位,并基于三维数字矿床模型,分别以目标函数最大化和净现值