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[目的]研究大花蕙兰茎尖外植体原球茎诱导及增殖培养、褐化污染的影响因素.[方法]以大花蕙兰茎尖作为外植体,研究无菌系建立、诱导培养的灭菌方法与褐化防治、原球茎诱导培养初始培养基的筛选、原球茎增殖培养的影响因素.[结果]结果表明:解决茎尖内生菌污染及褐化严重的问题,两段式灭菌(75%酒精30 s +0.1%升汞10 min+剥去幼叶+0.05%升汞5min)优于单一式的灭菌;原球茎诱导培养基为1/2MS+ 2.0 mg/L 6-BA+ 0.2 mg/L NAA;原球茎增殖培养基为1/2MS+ 2.0 mg/