【摘 要】
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目的：利用磁珠富集法分离半夏微卫星序列,以开发半夏微卫星引物。方法：根据链亲和素磁珠和生物素特异结合的特性,将微卫星探针5′端生物素化后与链亲和素磁珠特异结合,用磁珠和
【机 构】
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南京农业大学中药材研究所,华侨大学生物工程与技术系
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目的：利用磁珠富集法分离半夏微卫星序列,以开发半夏微卫星引物。方法：根据链亲和素磁珠和生物素特异结合的特性,将微卫星探针5′端生物素化后与链亲和素磁珠特异结合,用磁珠和探针的结合物与两端连接已知序列人工接头的半夏基因组DNA酶切片段杂交,洗脱未杂交DNA片断后,建立微卫星文库。以此为模板用人工接头序列为引物进行PCR扩增,产物直接克隆,经菌液PCR筛选后测序分析。结果：得到15条半夏微卫星序列,开发效率为93.75%。结论：结果显示这是一种快速而有效的微卫星开发方法。
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